Çin Hamster Over Hücre hatalrında Doksorubisin ile birlikte Epigallokateşin gallat veya Rosmarinik asit uygulanmasıyla mTOR(Rapamisin Memmeli Hedefi) protein düzeyinin araştırılması


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Yıldız Teknik Üniversitesi, Fen-Edebiyat Fakültesi, Moleküler Biyoloji ve Genetik Bölümü, Türkiye

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Sinem Helvacıoğlu

Danışman: Şenay Vural Korkut

Özet:

Sitotoksik etki ve metabolik aktivitenin belirlenmesi için kullanılan diğer bir yöntem ise  WST-1 testidir. WST-1 testide radyoaktif olmayan, kolorimetrik ve spektrofotometrik bir yöntemdir. WST-1 negatif yüklüdür ve hücre membranını geçemezler. Bu yüzden tetrazolyumun formazan ürününe redüksiyonuna yardımcı olmak için elektronları sitoplazma ya da plazma membranına transfer edebilen fenazin metil sülfat ya da fenazin etil sülfat gibi bir orta seviye elekron alıcıyla birlikte kullanılırlar. Elektron alıcı molekül, hücre içerisine girerek sitoplazmadan ya da plazma membranından elektron alır ve hücre kültürü ortamına geri dönerek tetrazolyum bileşiğini indirger. İndirgenme sonucu oluşan formazan ise suda ve dolayısıyla vasatta çözünebilir niteliktedir. Tetrazolyum bileşikleri canlı hücreler tarafından direk hücre kültür medyumunda çözünebilen formazan ürünleri oluşturmak için indirgenebilirler. Bu gelişmiş tetrazolyum bileşikleri test prosedüründeki bir basamağı formazan çökeltilerinin çözünmesi için test ortamına ikinci bir reaktif (alkol veya dimetil sülfoksit) eklenmesi gerekmediğinden, bu protokol günümüzde daha çok tercih edilmektedir.