Çevresel Örneklerden Aktinobakterilerin İzolasyonu ve Biyoaktivite Profillerinin Belirlenmesi


Ay H. (Yürütücü)

Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, 2019 - 2020

  • Proje Türü: Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje
  • Başlama Tarihi: Ocak 2019
  • Bitiş Tarihi: Ocak 2020

Proje Özeti

Aktinobakteriler topraktaki mikrobiyal kütlenin önemli bir bölümünü oluşturan ve antibiyotikler başta olmak üzere immünosüpresif ajanlar, antitümör ajanlar ve enzimler gibi çeşitli sekonder metabolitleri üretme potansiyeline sahip, ticari değeri olan bakterilerdir. Artan antibiyotik direnci ve tedavideki yetersizlikler nedeniyle yeni biyoaktif bileşiklerin keşfinin gerekliliği her geçen gün önem kazanmaktadır. Bu tez çalışmasında daha önce izolasyon çalışması yapılmamış olan Erzurum-Oltu ve Antalya-Kumluca bölgelerinden farklı fizikokimyasal özelliğe sahip toprak örnekleri alınarak 340 aktinobakteri izole edilmiştir. İzole edilen aktinobakterilerin bir kısmı cins düzeyinde tanımlanmış ve bu suşların Arthrobacter, Leifsonia, Nocardia, Nocardioides, Nonomuraea, Pseudonocardia, Saccharothrix ve Streptomyces cinslerine ait oldukları belirlenmiştir. İzole edilen aktinobakteriler hava miseli spor rengine, substrat misel rengine ve çözünür pigment rengine göre 41 renk grubuna ayrılarak her gruptan en az bir izolat olacak şekilde 60 aktinobakteri suşu seçilerek antimikrobiyal aktivite ve sitotoksisite testleri yapılmıştır. Testlerde kullanılmak üzere metanol ham özütleri elde edilmiştir. Antimikrobiyal aktivite testi disk difüzyon metoduyla yapılmış ve 30 aktinobakteri özütünün antimikrobiyal aktiviteye sahip olduğu belirlenmiştir. En iyi antimikrobiyal aktivite gösteren MK37H, BK2H ve AS18H özütleri için mikrodilüsyon tekniğiyle MİK değerleri belirlenmiştir. 60 özütün kanser hücreleri üzerindeki sitotoksik etkisi MTT analizi ile belirlenmiş ve 16 özütün AR42J pankreas kanser hücreleri üzerinde sitotoksik etkisi olduğu görülmüştür. Ayrıca Streptomyces sp. BG9H suşunun tüm genom analizi yapılarak CRISPR/Cas dizilerinin ve antibiyotik direnç genlerinin varlığı in silico olarak tespit edilmiştir. Sonuç olarak, 16S rRNA gen dizi benzerlik oranına göre yeni tür olarak değerlendirilen izolatların ileride yapılması planlanan polifazik taksonomik analizler sonucunda literatüre kazandırılması ve antimikrobiyal ve/veya sitotoksik aktivite gösteren suşların biyoaktif metabolitlerinin tanımlanması hedeflenmektedir.