15. Uluslararası Bilimsel Çalışmalar Kongresi, 26 December 2024 - 27 May 2025, pp.425-426, (Summary Text)
2019 yılında ortaya çıkan şiddetli akut solunum yolu sendromu Koronavirüs 2'nin (SARSCoV-
2) neden olduğu son yeni koronavirüs hastalığı (COVID-19) salgını, dünya çapında bir
pandemiye sebep olmuştur. Bugün COVID19’un toplumda yarattığı baskı azalmış olmasına
rağmen; COVID-19’un akut ve post akut fizyopatolojik etkilerini öğrenmeye ve tedavi
yöntemleri geliştirmeye yönelik araştırmalar devam etmektedir. SARS-COV-2, Tümör Nekroz
Faktör Alfa (TNFa) ve diğer pro-inflamatuar sitokinlerin salınımına sebep olmaktadır. TNFa,
kan damarlarının en içteki tabakası olan vasküler tonusun, doku hemostazının, bariyer
bütünlüğünün, inflamasyonun, oksidatif stresin, vasküler geçirgenliğin ve yapısal ve
fonksiyonel bütünlüğün hassas kontrolünü içerme görevleri olan endotel tabakasında endotel
disfonksiyona neden olmaktadır. Çalışmamızda, Tümör Nekrosiz Faktör Alfa (TNFa) ile
uyarılan insan umbilikal endotel hücrelerinin (HUVEC) gen ifadeleri üzerinde mezenkimal kök
hücre (MKH) koşullandırılmış besi ortamının etkisinin in vitro şartlarda gözlemlenmesi
amaçlanmıştır. Bu amaçla MKH koşullandırılmış besi ortamı, insan Wharton jeli mezenkimal
kök hücrelerinin (Tissuecare Biyoteknoloji) serum içermeyen besi ortamına alınarak 48 saat
37°C ve %5 CO2 koşullarında inkübe edilerek elde edilmiştir. HUVEC (İnvitrogen) hücreleri,
24 kuyulu hücre kültürü kaplarına büyüme besi ortamı ile ekilmiştir. 24-48 saat sonra, kontrol
grubu hariç diğer hücreler 10 ng/mL TNF-a içeren besi ortamı ile değiştirilip 48 saat inkübe
edilmiştir. Grup-1 (kontrol hücre kültürleri) yeni büyüme besi ortamı, Grup-2 hücreler 10
ng/mL TNF-a içeren büyüme besi ortamı, Grup-3 hücreler 10 ng/mL TNF-a, %30 MKH
koşullandırılmış besi ortamı içeren büyüme besi ortamına ekilmişlerdir. Her grup 3’er tekrar
içermektedir. 48 saatlik inkübasyon sonrasında deney gruplarından total RNA izole edilerek
(Ecotech Biotechnology), cDNA sentezi Applied Bioscience High Capacity cDNA Reverse
Transcription Kit kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Beta 2 mikroglobulin (housekeeping gen),
VCAM, ICAM, PECAM, E selektin, CD80, CD86, IL1R,IL1b, vWF, KDR, FLT1, ACE2,
ADAMTS13, E-Selektin, CXCR3, NRF2 ve ACSL4 gen ifadelerinin oranları, kantitatif
polimeraz zincir reaksiyonu ile tespit edilmiştir.. Sonuçlar TNF-a uyarımı altında kontrol
grubuna göre, VCAM, ICAM, IL1R, IL1B, ACSL4 ve E-Selektin ifadelerinin artığı tespit,
vWF, KDR, FTL1, PECAM, ve NRF2 ifadelerinin azaldığını göstermektedir. TNF-a ve MKH
koşullandırılmış besi ortamına ve yalnızca MKH koşullandırılmış besi ortamı alınan hücre
kültürlerinde, vWF, KDR, FTL1 ve NRF2 ifadelerinde artış ve IL1B, IL1R ve ACSL4’te azalış
belirlenmiştir. Bu çalışma Yıldız Teknik Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri
Koordinasyon Birimi tarafından TYL-2024-6090 nolu proje kapsamında desteklenmiştir.”