Mezenkimal Kök Hücre Koşullandırılmış Besi Ortamının Tnf-A Uyarımına Bağlı Endotelyal Disfonksiyon Üzerine Etkileri


Creative Commons License

Ordu E., Ege R., Molo K., Çulcuoğlu O.

15. Uluslararası Bilimsel Çalışmalar Kongresi, 26 December 2024 - 27 May 2025, pp.425-426, (Summary Text)

  • Publication Type: Conference Paper / Summary Text
  • Page Numbers: pp.425-426
  • Yıldız Technical University Affiliated: Yes

Abstract

2019 yılında ortaya çıkan şiddetli akut solunum yolu sendromu Koronavirüs 2'nin (SARSCoV-

2) neden olduğu son yeni koronavirüs hastalığı (COVID-19) salgını, dünya çapında bir

pandemiye sebep olmuştur. Bugün COVID19’un toplumda yarattığı baskı azalmış olmasına

rağmen; COVID-19’un akut ve post akut fizyopatolojik etkilerini öğrenmeye ve tedavi

yöntemleri geliştirmeye yönelik araştırmalar devam etmektedir. SARS-COV-2, Tümör Nekroz

Faktör Alfa (TNFa) ve diğer pro-inflamatuar sitokinlerin salınımına sebep olmaktadır. TNFa,

kan damarlarının en içteki tabakası olan vasküler tonusun, doku hemostazının, bariyer

bütünlüğünün, inflamasyonun, oksidatif stresin, vasküler geçirgenliğin ve yapısal ve

fonksiyonel bütünlüğün hassas kontrolünü içerme görevleri olan endotel tabakasında endotel

disfonksiyona neden olmaktadır. Çalışmamızda, Tümör Nekrosiz Faktör Alfa (TNFa) ile

uyarılan insan umbilikal endotel hücrelerinin (HUVEC) gen ifadeleri üzerinde mezenkimal kök

hücre (MKH) koşullandırılmış besi ortamının etkisinin in vitro şartlarda gözlemlenmesi

amaçlanmıştır. Bu amaçla MKH koşullandırılmış besi ortamı, insan Wharton jeli mezenkimal

kök hücrelerinin (Tissuecare Biyoteknoloji) serum içermeyen besi ortamına alınarak 48 saat

37°C ve %5 CO2 koşullarında inkübe edilerek elde edilmiştir. HUVEC (İnvitrogen) hücreleri,

24 kuyulu hücre kültürü kaplarına büyüme besi ortamı ile ekilmiştir. 24-48 saat sonra, kontrol

grubu hariç diğer hücreler 10 ng/mL TNF-a içeren besi ortamı ile değiştirilip 48 saat inkübe

edilmiştir. Grup-1 (kontrol hücre kültürleri) yeni büyüme besi ortamı, Grup-2 hücreler 10

ng/mL TNF-a içeren büyüme besi ortamı, Grup-3 hücreler 10 ng/mL TNF-a, %30 MKH

koşullandırılmış besi ortamı içeren büyüme besi ortamına ekilmişlerdir. Her grup 3’er tekrar

içermektedir. 48 saatlik inkübasyon sonrasında deney gruplarından total RNA izole edilerek

(Ecotech Biotechnology), cDNA sentezi Applied Bioscience High Capacity cDNA Reverse

Transcription Kit kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Beta 2 mikroglobulin (housekeeping gen),

VCAM, ICAM, PECAM, E selektin, CD80, CD86, IL1R,IL1b, vWF, KDR, FLT1, ACE2,

ADAMTS13, E-Selektin, CXCR3, NRF2 ve ACSL4 gen ifadelerinin oranları, kantitatif

polimeraz zincir reaksiyonu ile tespit edilmiştir.. Sonuçlar TNF-a uyarımı altında kontrol

grubuna göre, VCAM, ICAM, IL1R, IL1B, ACSL4 ve E-Selektin ifadelerinin artığı tespit,

vWF, KDR, FTL1, PECAM, ve NRF2 ifadelerinin azaldığını göstermektedir. TNF-a ve MKH

koşullandırılmış besi ortamına ve yalnızca MKH koşullandırılmış besi ortamı alınan hücre

kültürlerinde, vWF, KDR, FTL1 ve NRF2 ifadelerinde artış ve IL1B, IL1R ve ACSL4’te azalış

belirlenmiştir. Bu çalışma Yıldız Teknik Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri

Koordinasyon Birimi tarafından TYL-2024-6090 nolu proje kapsamında desteklenmiştir.”