Aptamer tabanlı teikoplanin yüklü poli laktik ko-glikolik asit nanopartiküllerin staphylococcus aureus üzerine ın vitro etkisi
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Yıldız Teknik Üniversitesi, Fen-Edebiyat Fakültesi, Moleküler Biyoloji Ve Genetik Bölümü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2020
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: SAMET UÇAK
Danışman: Banu Mansuroğlu
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Bu tez çalışmasında; antibiyotik – mikroorganizma etkileşimini sınırlamak ve antibiyotik dozundaki kaybın önlenmesi amacıyla aptamer konjuge PLGA nanopartiküler sistem kullanıldı. Teikoplanin antibiyotiği ikili emülsiyon (su/yağ/su) çözücü buharlaştırma metodu kullanılarak PLGA nanoperiküllerine yüklendi ve PLGA nanopartikülleri (BOS) ve teikoplanin (TP) yüklü PLGA nanopartikülleri (FT) sentezlendi. BOS ve FT'ye ait yapılan 3 tekrarlı partikül boyutu ve zeta potansiyel ölçümü analizi sonuçlarına göre BOS için, partikül boyutu 228±1,484 nm olarak ölçülmüşken, FT için 226±5,568 nm ölçüldü. Nanopartiküllerin enkapsülasyon verimi (EV) %98, etken madde reaksiyon verimi (RV) %69 ve etken madde yükleme verimi (YV) %7 olarak ölçüldü. BET analizine göre, BOS ve FT için, BET yüzey alanı 7.9798 m2/g ve 10.0573 m2/g, Por hacmi 216.632 nm : 0.000 cm2/g ve > 117.233 nm : 0.000 cm2/g olarak ölçüldü. SEM ve AFM analizine göre, sentezlenen nanopartiküllerin nano boyutlu, dar bir aralıkta boyut dağılımına sahip, pürüzsüz–küresel şekilde oldukları saptandı. PLGA nanopartiküllerinin yüzeyi S.aureus bakterisine özgün olan aptamer ile konjuge edildi. FT-IR çalışmasında, NHS/EDC bağlayıcısının PLGA yüzeyine bağlandığı N-H bükülme titreşimi (1640-1550 cm-1) ile gösterildi. Yapılan kontrollü salım çalışmasında, PLGA' nın ilk 1 saat içinde enkapsüle ettiği teikoplaninin %55'ini, 20. gün sonunda %80'ini ortama bıraktığı belirlendi. Antimikrobiyal test olan Buyyon Dilüsyon (Brot Dilüsyon) testi uygulanarak, boş PLGA, saf teikoplanin, PLGA yüklü teikoplanin ve teikoplanin yüklü aptamer konjuge PLGA nanopartiküllerin referans suşlar üzerindeki etkinlikleri incelendi. Saf teikoplanine karşı aptamer konjuge teikoplanin yüklü PLGA'nın uygulandığı referans suşlarda, MİK değerlerinin S. aureus (ATCC 29213), S.aureus (ATCC 25923) ve S.aureus (ATCC 43300) suşlarında 32 kat, kan kültüründen izole edilen metisiline dirençli S.aureus (MRSA) klinik suşunda (EGE-KK-13), kan kültüründen izole edilen metisiline dirençli S.aureus (MRSA) klinik suşunda (EGE-KK-95) 64 kat daha düşük olduğu görüldü. S.aureus spesifik aptamer kullanıldığı için aptamerin S.epidermidis'e bağlanmadığı ve teikoplanin salımına izin vermediği gözlemlendi. Bunun sonucunda da S.epidermidis suşunda inhibisyon görülmedi. Elde edilen sonuçlar hedefe yönelik ilaç çalışmaları için umut vaat etmektedir.