MAPK6 genini hedefleyen siRNA yüklü PLGA nanopartiküllerinin MCF-7 meme kanseri hücre hattında antikanser etkilerinin değerlendirilmesi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Yıldız Teknik Üniversitesi, Fen-Edebiyat Fakültesi, Moleküler Biyoloji Ve Genetik Bölümü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2023
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: CEYHUN TORUNTAY
Danışman: Banu Mansuroğlu
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Meme kanseri, kadınlarda yaşam kalitesini oldukça düşüren ve fazla sayıda ölüme yol açan bir hastalıktır. Mevcut tedavi yöntemleri, etkili tedaviyi minimum yan etki ile sağlama bakımından istenilen düzeyden fazlasıyla uzaktır. MCF-7 meme kanseri hücrelerinde, Mitojenle aktive olan protein kinaz 6 (MAPK6) geninin aşırı eksprese edildiği bilinmektedir. Küçük mücadeleci RNA'lar (siRNA), RNA interferans mekanizması aracılı hedef genin ekspresyonunu etkili şekilde baskılayabilmektedir. Ancak, siRNA'ların negatif yükleri nedeniyle düşük hücresel alımı, hücrede kısa yarı ömürleri ve enzimatik aktiviteye karşı savunmasız olmaları siRNA bazlı terapötik stratejilerin önünde duran başlıca engellerdir. Yüksek biyouyumluluk sergileyen nanopartiküler taşıma sistemleri, bu engellerin ortadan kaldırılması açısından sıklıkla tercih edilmektedir. Bu tez çalışmasında, MAPK6 genini hedefleyen siRNA yüklü PLGA nanopartiküllerinin sentezlenmesi ve bu nanopartiküllerin MCF-7 meme kanseri hücre hattı üzerindeki olası antikanser etkilerinin incelenmesi amaçlanmıştır. MAPK6 siRNA yüklü PLGA nanopartikülleri (MAPK6 siRNA NP), scrambled siRNA yüklü PLGA nanopartikülleri (scrambled siRNA NP) ve boş PLGA nanopartikülleri (boş NP) ikili emülsiyon çözücü buharlaştırma yöntemi ile sentezlenmiştir. Sentezlenen nanopartiküllerin karakterizasyonu gerçekleştirilmiştir ve nanopartiküller enkapsülasyon etkinliği, boyut, şekil, yüzey özellikleri ve salım profili gibi özellikler bakımından uygun bulunmuştur. MAPK6 siRNA NP'nin MCF-7 hücreleri üzerindeki sitotoksik etkisi MTT testi ile incelenmiştir. MAPK6 siRNA NP için IC40 değeri 24 saat muamele sonrası 20 µg/mL, 48 saat muamele sonrası 30 µg/mL olarak belirlenmiştir. MAPK6 siRNA NP uygulamasının, MAPK6 gen ve protein ekspresyonunu, kontrol grubuna kıyasla anlamlı düzeyde azalttığı belirlenmiştir. Ardından, bu baskılamanın olası antikanser etkileri çeşitli analizler ile test edilmiştir. Analiz sonuçları, MAPK6 siRNA NP'nin, MCF-7 hücrelerinin migrasyonunu, proliferasyonunu ve koloni oluşturma yeteneğini anlamlı düzeyde azalttığını ve MCF-7 hücrelerinin apoptozunu anlamlı düzeyde artırdığını ortaya koymuştur. Sonuç olarak, MCF-7 hücrelerinde MAPK6 siRNA NP ile MAPK6 geninin baskılanmasının antikanser etkiye neden olduğunu belirlenmiştir. Bu durum, MAPK6'yı aday terapötik hedef haline getirmektedir. Anahtar Kelimeler: MAPK6, siRNA, PLGA nanopartikül, meme kanseri, antikanser