Decellularization of Sheep Aorta via Supercritical Carbon Dioxide


Creative Commons License

Zad Ghaffari Vahdat K., Türkoğlu N.

11. Uluslararası Akademik Araştırmalar Kongresi (ICAR), Ankara, Turkey, 25 - 26 July 2023, pp.291-292

  • Publication Type: Conference Paper / Summary Text
  • City: Ankara
  • Country: Turkey
  • Page Numbers: pp.291-292
  • Yıldız Technical University Affiliated: Yes

Abstract

Doku mühendisliği, farklı tipteki dokuları onarmak, iyileştirmek veya değiştirmek için uygun sentetik veya doğal doku iskelelerini kullanmaktadır. Hücresizleştirilmiş dokular bu alanda kullanılan doğal doku iskelelerine iyi bir örnektir. Hücresizleştirme işlemi, dokuların hücresel bileşenlerinin çıkarılmasıyla bir ekstraselüler matriks (ECM) iskelesi elde etmeyi amaçlamaktadır. İdeal hücresizleştirme işlemi birçok faktöre bağlı olduğundan metodolojik bir altın standardı bulunmamaktadır; bununla birlikte araştırmacılar, ECM yapısının mekanik ve biyokimyasal özelliklerini korumayı hedefleyerek fiziksel, kimyasal, enzimatik yöntemler ve bu yaklaşımların kombinasyonu dahil olmak üzere birçok çeşitli hücresizleştirme protokolleri geliştirmişlerdir. Fiziksel yöntemler arasında süperkritik karbondioksit (scCO2) yardımıyla hücresizleştirme ise son yıllarda popülerlik kazanmıştır. Bu yöntemi diğerlerinden ayıran en büyük avantaj, ECM yapısının mekanik özelliklerinin ve bulundurduğu çeşitli protein ve sitokinlerin yüksek oranda korunmasıdır. Bu çalışma kapsamında, kesimhaneden elde edilen koyun aortu süperkritik sıvı ekstraksiyon (SFE) cihazında scCO2 ile 1 saat muamele edilip ardından gece boyunca 0,1% Triton X-100’de bırakılarak hücresizleştirilmiştir. Ardından barındırdığı genetik materyal ve protein miktarı açısından karakterize edilmiştir. Bu iki yöntemin kombiniyle hücresizleştirilen koyun aortunun işlem görmemiş dokuya kıyasla genetik materyalinde %93 oranında azalma olduğu tespit edilmiştir. Ardından hücresizleştirilmiş ECM yapısındaki total protein, kolajen I (COL I), kolajen III (COL III), elastin (ELN) ve glikozaminoglikan (GAG) miktarının işlem görmemiş dokuya göre hangi oranlarda korunduğu ölçülmüştür. Analiz sonuçlarına göre ölçülen protein miktarları sırasıyla %94,18, %94,95, %86,32, %78,57 ve %86,54 oranında korunduğu tespit edilmiştir. Sonuç olarak kullanılan hibrit yöntemle başarılı bir şekilde %93’lük oranda hücresizleştirme işlemi gerçekleştirilmiş olup elde edilen ECM yapısının biyokimyasal özellikleri yüksek miktarlarda korunmuştur.